硒是人体必需的微量元素之一，影响着人体各项生理系统^[1]，硒的丰缺与人体健康程度密切相关。硒含量过高将引起人出现脱发等不良反应^[2]，而缺硒则易引发克山病、大骨节病等10余种疾病^[3]。研究发现我国三分之一的地区为严重缺硒区，导致当地居民食物中硒的摄入量偏低^[4]。农产品是居民食物的主要来源，通过摄入富硒作物是解决人体缺硒最有效的途径之一^[5]。添加外源硒是目前常用的人工富硒方式，郭文慧等^[6]对紫甘薯的研究表明，施硒能增加作物产量，同时能提高作物中硒的含量。适当喷施亚硒酸钠可提高稻谷产量及其硒含量^[7]。但不同作物对硒的富集能力具有差异性，且不同类型土壤对外源硒的储存、释放能力也不同，因而通过添加外源硒来生产富硒农产品有一定弊端。

土壤中硒的生物有效性是影响作物富硒的关键因素之一，富硒土壤中能被作物吸收利用的有效硒不到总硒的5%。曹容浩^[3]发现土壤有效硒主要受总硒、pH、有机质等因素影响，且土壤酸碱度是影响硒生物有效性的主要因素。我国南方地区土壤多以红壤为主，土壤中的硒大多以亚硒酸盐的形态存在，极易被铁铝氧化物吸附，导致土壤中生物有效态硒含量偏低^[8]，严重影响了富硒土壤资源的开发利用。基于此，有不少学者通过施加改良剂来提高土壤中硒的有效性，如施加秸秆生物质炭、钙镁磷肥等^[9]，谢邦廷等^[8]在土壤中添加生石灰和燃煤炉渣后，提高了pH和有效硒含量。但长时间添加生石灰易引起土壤板结，不利于作物生长，燃煤炉渣中可能含有放射性元素^[10]，会对人体健康带来威胁；磷肥等肥料施入土壤后易引起水体富营养化，也会在一定程度上提高土壤中镉元素的含量^[11]。因此，寻找安全有效的改良剂对提高富硒土壤中硒的有效性至关重要。

生物质炭是一种运用广泛的新兴土壤改良剂，含大量碳酸盐等碱性物质，能明显改善土壤酸碱度^[12]。钢渣中含有CaO、MgO、SiO₂等多种氧化物同时存在少量植物生长必须的微量元素，钢渣对农田土壤具有良好的改良效果，是一种潜在的多金属复合污染土壤改良剂。施加钢渣可有效提高土壤pH值和有效硅含量，并增加农作物产量^[13]。如邓腾灏博等^[14]研究表明土壤中施加钢渣后pH可从3.5提升到7.0，显著提高了酸性土壤的碱性，同时降低了土壤有效态重金属的含量及稻米中重金属的浓度。

丰城市境内存在大面积富硒土壤，平均硒含量为0.49mg/kg^[15]，属富硒地带(0.400~3.00mg/kg)^[16]。但该地区土壤主要以红壤为主，铁、铝氧化物含量较高，土质透气透水性能差、土质黏重，极大限制了土壤中硒的有效性。目前，诸旭东等^[17]通过添加钙镁磷肥、叶面喷硒等调控措施提高了该地区大米中的硒含量，但添加外源硒成本较高，不易大面积使用。本文以江西丰城富硒区土壤为研究对象，通过施加生物质炭、钢渣调控土壤理化性质，研究不同改良剂对土壤中硒生物有效性的影响，并探究不同类型生物质炭对土壤有效硒的调控是否具有相同效果，以期为富硒农产品的开发利用提供参考依据。

1.   实验部分

1.1   研究区域与样品采集

董家镇位于丰城市西北边陲，处丰城、高安两市交界处，气候类型为亚热带湿润气候，雨量充沛、四季分明，气候温和，该地区生态环境保护良好，素有“绿水青山”的美称。全镇有49平方多公里的富硒土壤资源，是“中国生态硒谷”核心区。

在前期调查的基础上，2018年7月，于董家镇泉南村富硒园地内，按梅花布点法采集园地表层土壤(0~20cm)各1kg左右，混合均匀后用四分法取2~3kg土壤为供试样品带回实验室。剔除植物根系、石块等杂物，置于阴凉处，自然风干过程中用木棒将土壤敲碎后，过10、20、60目筛、混匀、备用。供试土壤pH 4.24，总硒量为0.72mg/kg，有机质含量为3.28%，阳离子交换量(CEC)为4.2cmol/kg。

1.2   供试改良剂

1.2.1   生物质炭

从市场购买约3kg生物质炭粉末(江苏华丰农业生物工程有限公司)，去除大块杂质，过60目筛备用，pH=10.5。生物质炭的施加量会影响其对土壤理化性质的改良效果，当施加量为10g/kg时，其对土壤理化性质的影响不太明显，基于此，本次试验设置3个不同梯度，即2g/kg、10g/kg、30g/kg(记为处理1~3)。试验时每个塑料烧杯中加入100g过10目筛的供试土壤，并分别添加0.2g、1.0g、3.0g生物质炭于烧杯后，用玻璃棒搅拌均匀。

1.2.2   钢渣

钢渣采自南昌市钢铁厂，采回的钢渣经研磨后过60目筛，混匀，备用，测得pH为9.2，总硒含量为0.42mg/kg。同时测定了钢渣中部分重金属含量Cr(131.2mg/kg)、As(22.7mg/kg)、Cd(0.18mg/kg)、Hg(1.20 mg/kg)和Pb(33.2mg/kg)几种重金属含量值均在《肥料中砷、镉、铅、铬、汞生态指标》(GB/T 23349—2009)的限定值内(Cr：500mg/kg、As：50mg/kg、Cd：10mg/kg、Hg：5mg/kg和Pb：200mg/kg)，因此，本实验所选钢渣可适用于土壤中。土壤改良时钢渣用量一般低于10g/kg^[14]。实验设置3个不同梯度的钢渣添加量，即1、5、15 g/kg(记为处理6~8)。实验时每个塑料烧杯中加入100 g过10目筛的供试土壤，同时分别加入0.1、0.5、1.5g钢渣至烧杯后，用玻璃棒充分搅拌均匀。

本实验以0.1g钢渣+2g生物质炭记为处理4，设一组空白对照，记为处理BK/5，每个处理重复3次。

1.3   土培试验

称取100g供试土壤于塑料烧杯中，添加改良剂并搅拌均匀后，用量筒量取约34mL纯水缓慢加入烧杯中，边加边搅拌，使供试土壤被均匀润湿，盖上塑料薄膜保湿。实验过程中观察土壤湿度，若发现土壤有变干的趋势及时加入适量纯水，每隔三天用称量法补充蒸发损失的水分，保证土壤润湿度，同时每隔7d搅拌一次土壤，并及时去除长出的杂草。土培实验持续时间为60d，于15、45和60d各取样一次。取出的土壤置于干燥通风处自然风干后研磨过20目和60目，装袋备用。

1.4   盆栽实验

试验于2018年9月15号在南昌大学环境楼楼顶进行。共设置7个处理和一个空白，试验用盆为聚乙烯材质(直径18cm，高19.5cm)，每盆装土1kg。将小白菜种子在35℃催芽处理，小白菜种子发芽后的第二天将其移至土壤中种植，每盆定植5株，定期浇纯水，直至成熟。为防止试验过程中蔬菜营养匮乏，实验开始时每盆施加定量的有机肥作为底肥，每天定期浇水，保持土壤湿度，蔬菜生长中期追加底肥，蔬菜整个生长成熟期为45d，成熟后采摘蔬菜可食用部分，同时将收获小白菜后的土壤风干磨碎过筛待测其中的有效态硒。

1.5   土壤各项指标测试方法

土壤pH的测定参照标准NY/T 1377—2007《土壤的测定》：称取过20目筛的土壤样品10.0g于离心管中，按土液比1 : 2.5浸提，剧烈振荡5min后静置1~3h，测定土壤上清液pH，测定精度为0.01。

土壤有机质的测定参照标准HJ 615—2011《土壤有机碳的测定重铬酸钾氧化-分光光度法》：称取一定试样于100mL具塞消解管中，分别加入0.1g硫酸汞和5.0mL重铬酸钾溶液，再加入7.5mL硫酸，摇匀后置于135℃恒温加热器中开塞加热半小时，冷却定容。

阳离子交换量(CEC)的测定由江西索立德环保服务有限公司完成，分析方法参照LY/T 1243—1999《森林土壤阳离子交换量的测定》。

有效态硒的提取和测定：称取过20目筛土壤3.000g，用0.7mol/L磷酸二氢钾溶液浸提土壤有效态硒^[18]，提取的上清液经消化处理后用AFS-8230双通道原子荧光光度计测定硒含量^[18-19]。

1.6   分析质量控制

样品分析时, 插入土壤标准物质(GBW07408)进行质控分析。经检查，样品重复率为100%，合格率为100%，分析精密度、报出率、检出限及相关参数均达到了《多目标区域地球化学调查规范(1 : 250000)》(DZ/T 0258—2014)的要求。分析结果满足本次研究所需。

2.   两种改良剂对硒有效性的影响及作用机理

2.1   不同处理对土壤硒有效性的影响

土壤中硒的生物有效性与其不同的赋存形态有关。由硒在土壤中不同形态的分布结果(表 1)可知，土壤中的硒主要以有机结合态和残渣态形式存在，水溶态和可交换态硒含量较少。添加改良剂后供试土壤中硒的形态分布比例有所不同，其中以水溶态和有机结合态硒的变化最显著。土壤中施加生物质炭后，水溶态硒的含量随时间推移逐渐减少，有机结合态硒含量则有所上升；添加钢渣后，水溶态和可交换态硒含量有所增加，有机结合态硒含量呈下降的趋势。铁锰氧化物结合态和残渣态在此次实验中基本没什么变化。由本实验结果可发现，当土壤环境变化时，有机结合态硒易转化为其他形态硒。

表  1  土壤中各形态硒含量

Table  1.  Content of different Se species in soil

处理编号	水溶态硒(μg/kg)			可交换态硒(μg/kg)			铁锰氧化物结合态硒(μg/kg)			有机结合态硒(μg/kg)			残渣态硒(μg/kg)
	15d	45d	60d	15d	45d	60d	15d	45d	60d	15d	45d	60d	15d	45d	60d
1	10.52	9.78	8.61	10.76	10.07	9.33	64.88	65.52	66.01	302.64	305.16	309.78	331.20	329.47	326.47
2	10.46	9.64	8.46	10.98	9.69	9.01	64.62	65.72	65.72	303.62	307.20	310.98	330.32	327.75	326.03
3	9.70	8.80	8.02	9.40	9.16	8.62	64.30	65.26	66.98	305.84	311.98	314.64	330.76	324.80	321.94
4	10.42	8.43	7.11	10.49	7.74	8.16	65.27	64.89	64.26	311.06	319.85	315.84	322.76	319.10	324.64
5	10.05	10.09	10.54	10.21	9.54	9.12	64.02	65.17	66.73	312.58	308.76	306.22	323.15	326.43	327.69
6	10.72	11.52	12.01	9.81	10.58	10.03	68.96	67.82	67.02	308.50	304.22	302.32	322.01	325.86	325.67
7	12.06	15.46	17.78	10.63	11.39	12.55	75.40	74.72	74.16	309.20	305.74	301.76	322.70	322.67	326.75
8	15.16	19.04	23.64	12.82	15.40	17.34	75.48	74.56	74.68	307.00	302.30	295.08	327.53	328.68	329.26

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土壤中有效硒含量的高低可以反映植物对硒的吸收富集水平，是决定植物中硒含量的主要因素。本实验中，不同处理下土壤有效硒含量呈现不同的变化趋势(图 1)。土壤中施加生物质炭后，有效硒含量随培养时间的推移呈逐渐下降的趋势，且当生物质炭添加量增大时，有效硒含量的下降幅度也越大。土培实验结束后，处理1~4中土壤有效硒含量降幅分别为8.4%、10.8%、15.1%和23.6%(图 1a)。而谢珊妮等^[9]用秸秆生物质炭改良强酸性高硒茶园土壤有效硒时发现，土壤中施加秸秆生物质炭，60d后土壤有效硒提升的幅度大于土培至30d土壤有效硒含量提高的幅度，与本文得出的结论不一致。这可能与秸秆生物质炭的原料、制备条件、添加量及土壤本身的性质有关。制备生物质炭的原料和条件不同时，其孔隙结构、比表面积、pH等理化性质也将表现出显著的差异^[20]。赵世翔等^[21]研究发现制备生物质炭的温度从300℃升高至600℃时，其比表面积可由2.35m²/g增大到107.76m²/g，当制备温度由500℃增至600℃时，生物质炭的比表面积增幅可达到942.17%。生物质炭表面碱性官能团的含量随制备温度的升高而增大^[22]。本试验所用生物质炭pH为10.5，制备温度为550℃，而谢珊妮等^[9]所用秸秆生物质炭pH为7.87。本研究土培实验结束后，空白组与添加3g/kg生物质炭实验组中土壤富里酸含量分别为4.43g/kg和7.08g/kg，胡敏酸含量分别为6.21g/kg和11.32g/kg。富里酸能提高土壤中硒的有效性，而胡敏酸则会降低土壤有效硒含量^[23]。因此，本实验使用的生物质炭对硒主要表现为固定吸附性。

图  1  两种改良剂对土壤有效硒的调控效果

Figure  1.  Effect of two amendents on the available selenium in soil

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土壤中添加钢渣后，有效硒含量有不同程度的提升，且有效硒含量随土培时间的推移有逐渐上升的趋势。土培实验结束时，处理7和8中有效硒含量分别为27.41μg/kg、38.98μg/kg，与对照组(19.36μg/kg)相比(图 1b)，有效硒含量是对照组的1.4倍和2.0倍。

实验发现，处理4中有效硒含量降得最多。由土壤中各形态含量结果表明，添加钢渣后可在一定程度上提高土壤中水溶态硒的含量，但因生物质炭具有较强的吸附固定作用，导致处理4土壤中的有效硒含量下降较快。

2.2   不同处理影响土壤中硒有效性的机理

2.2.1   改良剂对土壤pH的影响

本实验的供试土壤为酸性土，经生物质炭调控处理后，pH值均有所上升，且随生物质炭添加量的增加而增大(图 2a)。土培实验进行至60d时，添加生物质炭使土壤pH提升了0.1~0.61个单位不等。生物质炭是目前运用最广的一种土壤改良剂，其表面含有大量羟基、酚羟基等含氧官能团，这些官能团与H⁺发生络合反应，达到中和土壤酸度的目的^[24]，另一方面生物质炭中丰富的钾、钠盐基离子通过吸持作用降低了土壤中交换性H⁺、Al³⁺的水平^[25]。

图  2  两种改良剂对土壤pH的影响

Figure  2.  Effect of two amendents addition on soil pH

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添加钢渣后，土壤pH也呈上升趋势(图 2b)，pH上升程度与钢渣的添加量成正比。土培实验结束时，与对照组相比，土壤pH提升幅度为0.38~3.79个单位。相比于生物质炭，钢渣对土壤pH的改良效果更显著。钢渣中Ca、Mg、Si等多种氧化物经水解后释放出的OH^-中和了土壤中的H⁺，同时含硅物质会抑制Al³⁺的活性^[26]。由图 2b中可以看出，当钢渣施用量超过0.5%时，将大幅度改善土壤pH。

pH是影响土壤理化性质最重要的参数之一。pH通过改变土壤表面电荷进而影响土壤对硒的吸附能力^[9]，pH升高时，土壤表面的OH^-也有所增加，释放出的OH^-会竞争土壤表面的吸附位点，降低铁铝氧化物对硒的吸附能力^[27]，从而提高有效硒含量。实验结果表明，两种改良剂均能提高土壤pH。由添加生物质炭和钢渣后土壤pH随时间的动态变化(图 2)可以看出，土壤pH随土培时间呈下降的趋势。培养结束时，以空白对照组为例，pH由初始4.24降为4.07，下降了0.17个单位。这主要是因为表层耕地土壤中有一定量的铵态氮残留，土培过程中因铵态氮逐渐发生硝化反应释放出的质子导致pH下降^[28]。图 3结果显示，土培实验结束后空白组与添加改良剂的土壤中铵态氮含量低于硝态氮，土培过程中土壤的硝化反应导致了pH下降。

图  3  土培结束时土壤铵态氮和硝态氮含量

Figure  3.  Content of soil NH₄⁺-N and NO₃^- in soil at the end of incubation

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2.2.2   改良剂对土壤有机质和CEC的影响

土壤有效硒受土壤总硒、pH和Eh、化学矿物组成、有机质、阳离子交换量、土壤黏粒、土壤中离子竞争等因素的影响。本研究中，改良剂施入土壤后有机质含量变化(表 2)显示，添加少量生物质炭对土壤有机质的影响并不明显，当添加量较大时，土壤有机质含量有所上升，且有机质含量随生物质炭施加量的增加明显增大。而钢渣对土壤有机质的影响并不显著。在改善土壤有机质方面，生物质炭中含有较高的碳，其自身缓慢的分解有利于土壤腐植质的形成^[29]，从而可显著提高土壤有机质含量。因钢渣自身存在的特性，钢渣施加进土壤后，对土壤有机质基本无显著影响。

表  2  不同处理对土壤性质的影响

Table  2.  Effects of different treatments on soil properties

处理方法	有机质含量(%)			CEC(mol/kg)
	15d	45d	60d	15d	45d	60d
生物质炭0.2%	3.21	3.11	2.63	4.0	3.9	3.7
生物质炭1.0%	3.38	3.22	2.77	4.2	4.2	4.3
生物质炭3.0%	5.52	4.81	4.54	4.8	4.5	4.3
生物质炭2%+钢渣0.1%	3.30	3.12	2.66	4.4	4.2	4.3
空白对照组(BK)	3.28	2.80	2.66	4.2	4.1	4.0
钢渣0.1%	3.23	3.00	2.80	4.0	4.2	3.9
钢渣0.5%	3.09	2.82	2.79	6.7	6.8	6.2
钢渣1.5%	2.90	2.86	2.79	9.8	9.0	8.8

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有机质对土壤中硒的吸附作用由有机质的组分和量所决定，并对硒的影响表现出双重性:一方面与有机质结合的硒经矿化作用可转变为亚硒酸等可溶性硒释放到土壤中^[30]，提升土壤中可溶性硒的含量，另一方面有机质具有较强的固定性，会降低土壤有效硒含量^[2]。研究表明有机质对硒的影响主要表现为固定作用^[31]。

土壤CEC是土壤主要理化性质之一，不同土壤中CEC含量也不同，其主要受pH、土壤质地和有机质含量的影响^[3]。本实验中添加少量生物质炭、钢渣对土壤CEC的影响都较小，但随两种改良剂添加量的增大，土壤CEC也随之增大，且钢渣的影响效果明显高于生物质炭(表 2)。王文艳等^[32]发现pH对CEC的贡献最为显著，且土壤pH与CEC具有显著的正相关关系。因此，钢渣在提高土壤pH时，也将明显增加CEC的含量。CEC含量越高时，土壤表面所含的负电荷量也越多，对硒的吸附量则会降低，有利于提高土壤有效硒的含量。

为明确土壤理化性质与有效硒之间的关系，本文对两者进行了相关性分析。结果表明，有效硒含量与pH、CEC呈显著正相关，相关系数分别为0.787和0.780(p < 0.01)，与有机质呈负相关，相关系数为0.382(p < 0.05)。

3.   两种改良剂提高土壤有效硒的效果评价

不同处理下，土壤有效硒含量在土培试验过程中表现出一定的差异性(图 4)。土培结束后，8个处理中，除处理7、8外，其他处理对土壤有效硒的影响较为相近，均呈下降的趋势。添加生物质炭可在一定程度上提高土壤pH，但本实验所用生物质炭的孔隙度和比表面积较大，且生物质炭施入土壤后会提高土壤中富里酸的含量。因此，随生物质炭添加量的增加，土壤中有效硒含量降得也越快。钢渣能有效改善土壤酸碱度，有助于硒元素的活化，并提高土壤中硒的有效性。实验结果显示，当钢渣添加量为0.5%和1.5%时，土壤pH值分别为5.82和7.88，而大部分植物生长的最适pH在5.0~7.0之间。本实验的两种调控材料，生物质炭主要表现为固定性，不适合用来改善研究区土壤中硒的有效性，钢渣作为调控材料，能显著提高研究区土壤有效硒含量，但应根据植物生长条件来确定钢渣的添加量。本文建议钢渣使用量不应超过1.5%。

图  4  不同处理对土壤有效硒的改良效果

Figure  4.  Effect of different treatments on the available selenium in soil

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4.   盆栽小白菜富硒试验

蔬菜是人类生存所必需的食物，不同蔬菜品种对硒的吸收性能也不同。十字花科植物对硒有较强的富集能力，而小白菜是常见的十字花科蔬菜，是人体补硒的理想硒源，且其生长周期短、适于四季栽种，有利于大规模生产。本文盆栽实验以小白菜为试验蔬菜，研究两种改良剂不同添加量对小白菜富硒的影响效果。

土壤有效态硒的含量是影响植物中硒含量的主要因素，且土壤中化学有效态硒含量的增加可直接影响硒的生物有效性^[9]。盆栽试验结果(图 5)显示，与对照组相比，处理7和8中小白菜硒含量增幅分别为30.0%和58.8%，处理1、处理2和处理6中虽均未提高小白菜硒含量，但种植出的小白菜基本仍属于富硒蔬菜(富硒蔬菜的硒含量≥0.01mg/kg)，而处理3和处理4中的小白菜硒含量都低于0.01mg/kg。本实验中，碱性改良剂钢渣通过提高土壤硒的有效性，进而提高了小白菜中硒的含量，可使当地的硒资源得到充分利用，为进一步开发富硒蔬菜提供了依据。

图  5  不同处理下小白菜可食用部分硒含量

Figure  5.  Se content in edible parts of Chinese cabbage under different treatments

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5.   结论

利用改良剂调控富硒土壤中硒生物有效性的土培模拟实验结果表明，施加生物质炭和钢渣均能提高酸性土壤pH和CEC含量，并能在一定程度上提升硒的有效性，但施加生物质炭后土壤中有机质含量显著增加，且有机质对硒表现为固定作用，导致土壤有效硒含量总体偏低，而钢渣对pH和CEC的影响效果更明显，并能显著活化硒的有效性。因此，钢渣较生物质炭更适合作为该地区土壤硒有效性的调控材料。根据蔬菜生长的pH环境，本研究建议钢渣的使用量不要超过1.5%。

土壤自身具有吸附-解吸作用，并含有多种还原性微生物，能将土壤中有效硒含量维持在一定的水平。土壤中添加钢渣后可将有效硒含量提升至一定程度，同时促进作物对硒的吸收利用，有利于富硒农产品的生产。但改良剂对土壤有效硒活化的机理及其变化规律十分复杂，今后还需进一步研究。